Il est surtout connu pour avoir joué le rôle du docteur Sam Loomis poursuivant Michael Myers dans la série de films d'horreurs Halloween. Il incarna aussi Blofeld, l'ennemi implacable de James Bond dans On ne vit que deux fois et le mari de Françoise Dorléac dans Cul-de-sac de Polanski, une de ses interprétations les plus acclamées.
En 1960, il créa le rôle de Davies dans la pièce du prix Nobel Harold Pinter, The Caretaker (Le Gardien).
Sa carrière ne fut pas à la hauteur de son talent. La mythique scène de fin du premier Halloween, avec un visage et un regard d'une incroyable intensité, prouve à quel point Donald Pleasence était l'un des acteurs les plus doués de sa génération.
